技術(shù)文章
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技術(shù)文章
2016-318
首先引物與模板的序列要緊密互補(bǔ),其次引物不能在模板的非目的位點(diǎn)引發(fā)DNA聚合反應(yīng)(即錯(cuò)配),再次引物與引物之間避免形成穩(wěn)定的二聚體或發(fā)夾結(jié)構(gòu)。引物設(shè)計(jì)應(yīng)注意如下要點(diǎn):1.引物的長度一般為15-30bp,常用的是18-27bp。2.引物序列在模板內(nèi)應(yīng)當(dāng)沒有相似性較高,尤其是3’端相似性較高的序列,否則容易導(dǎo)致錯(cuò)配。引物3’端出現(xiàn)3個(gè)以上的連續(xù)堿基,如GGG或CCC,也會(huì)使錯(cuò)誤引發(fā)機(jī)率增加。3.引物3’端的末位堿基對(duì)Taq酶的DNA合成效率有較大的影響。不同的末位堿基在錯(cuò)配位置導(dǎo)...
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2016-318
蠕動(dòng)泵引起這種現(xiàn)象的主要原因是系統(tǒng)內(nèi)存在氣泡。此時(shí)需要仔細(xì)檢查輸液管與泵頭下閥是否擰緊,四氟管有無裂紋等,因?yàn)橐后w在流動(dòng)時(shí),在流經(jīng)處產(chǎn)生微小的負(fù)壓,空氣會(huì)進(jìn)入系統(tǒng)。當(dāng)檢查完確認(rèn)以后,將放空閥逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)一圈左右后,用手按住運(yùn)行鍵,此時(shí),泵以zui高的流速從排空閥流出,氣泡隨之流出。當(dāng)泵頭經(jīng)過清洗后,或者更換流動(dòng)相時(shí),必須要經(jīng)過這一相操作。此法效果不佳時(shí),可以將主泵頭上閥的壓帽松開一點(diǎn)(約三分之一圈左右)存在單向閥內(nèi)的氣泡就可以排除。當(dāng)儀器是新購買或較長時(shí)間沒有使用,有時(shí)也會(huì)出現(xiàn)...
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2016-317
蠕動(dòng)泵的原理簡介:蠕動(dòng)泵由于輸出的流量非常穩(wěn)定因此又叫恒流泵,由于蠕動(dòng)泵是靠擠壓軟管而達(dá)到泵送流體的功能的因此又叫軟管泵。蠕動(dòng)泵的機(jī)械原理十分簡單。它是由轉(zhuǎn)輪擠壓著泵管并轉(zhuǎn)動(dòng)從而推動(dòng)管內(nèi)的流體向前移動(dòng)從而產(chǎn)生流體流動(dòng)的,就象用兩根手指夾擠一跟充滿液體的軟管一樣,隨著手指的移動(dòng),管內(nèi)形成負(fù)壓,液體隨之流動(dòng)。蠕動(dòng)泵這種產(chǎn)品由于具有恒流泵功能和潔凈操控方便等多種功能,因此在各種行業(yè)都有著廣泛的應(yīng)用。生物醫(yī)藥溶劑、酸、堿、植物提煉液、軟膏、血漿石油、化工酸、堿、溶劑、懸浮物、分散體系...
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2016-317
旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀是實(shí)驗(yàn)室和科研機(jī)構(gòu)常用的儀器設(shè)備,下面我們就來了解一下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀的結(jié)構(gòu)和工作原理是怎樣的。旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀結(jié)構(gòu)原理:結(jié)構(gòu):蒸餾燒瓶是一個(gè)帶有標(biāo)準(zhǔn)磨口接口的茄形或圓底燒瓶,通過一高度回流蛇形冷凝管與減壓泵相連,回流冷凝管另一開口與帶有磨口的接收燒瓶相連,用于接收被蒸發(fā)的有機(jī)溶劑。在冷凝管與減壓泵之間有一三通活塞,當(dāng)體系與大氣相通時(shí),可以將蒸餾燒瓶,接液燒瓶取下,轉(zhuǎn)移溶劑,當(dāng)體系與減壓泵相通時(shí),則體系應(yīng)處于減壓狀態(tài)。使用時(shí),應(yīng)先減壓,再開動(dòng)電動(dòng)機(jī)轉(zhuǎn)動(dòng)蒸餾燒瓶,結(jié)束時(shí),應(yīng)先停機(jī)...
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2016-316
PCR擴(kuò)增后一般進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳分析,電泳后一般有以下幾種條帶:1、引物帶。引物濃度過高或是擴(kuò)增效率不是特別高時(shí)都會(huì)有,一般不呈現(xiàn)為細(xì)帶,為發(fā)散狀;如果目的擴(kuò)增產(chǎn)物帶和引物帶都很亮,可以考慮適當(dāng)降低引物量。2、引物二聚體帶。比引物跑得慢一點(diǎn),條帶清晰,但如果擴(kuò)增產(chǎn)物小于100bp時(shí),產(chǎn)物與引物二聚體就不好分別了,建議采用DNA聚丙烯酰胺電泳(不是蛋白質(zhì)的SDS聚丙烯酰胺電泳);如果引物二聚體在優(yōu)化復(fù)性溫度后仍然嚴(yán)重影響目的產(chǎn)物的擴(kuò)增,優(yōu)先考慮更換引物設(shè)計(jì)(因?yàn)橐锖铣傻某杀?..
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